연구성과

DPPH는 유기 화합물 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl의 일반적인 약어입니다.

DPPH assay 란?

DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) assay는 항산화 활성을 측정하는 대표적인 실험 방법 중 하나로, 자유 라디칼 소거 능력을 평가하는 데 사용됩니다.

DPPH 라디칼은 안정적인 질소 중심의 자유 라디칼이며, 보라색을 띠고 있습니다. 항산화 물질이 DPPH 라디칼과 반응하면 전자를 공여하여 라디칼을 환원시키고,

이 과정에서 색 변화(보라색 → 옅은 노란색 또는 무색)가 일어납니다. 이러한 색 변화의 정도를 분광광도계로 측정하여 시료의 항산화 활성을 평가할 수 있습니다.

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자세한 시험 방법을 알아볼까요?

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시료 정보

( 시험 전 최고-최소 농도 설정 필요, 기본5개 농도 시험, 최고-최소 농도 사이의 3가지 농도 결정하여 시험 진행)

액상 상태의 시료물질, 점성이 있는 물질의 경우 희석해서 사용

Powder 시료의 경우 g/ml 또는 mg/ml로 농도를 맞춰서 사용

시료가 녹지 않는 경우 용출하여 사용(온도를 높여 끓이거나 sonicator를 이용하여 파쇄하여 진행)

시험방법

① DPPH시약 4 mg을 methanol 100 mL에 녹인 후(100 μM 농도로 제조) , -20 °C에서 보관

② DPPH 용액은 methanol을 이용하여 시험 전에 517 nm에서 흡광도 0.5 ± 0.05로 조정하여 사용.

③ 시료 20 μL에 DPPH 용액 180 μL을 첨가하고, 실온의 암소에서 30분간 반응.

④ UV-Vis spectrophotometer를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정.

DPPH assay는 천연 항산화제 연구, 식품 및 화장품 산업에서 항산화 성분 평가, 신약 개발 과정에서 항산화 후보 물질 스크리닝 등에 널리 활용된다고 합니다.

특히, 폴리페놀, 플라보노이드, 비타민 C, 비타민 E 등의 항산화 효과를 평가하는 데 중요한 방법으로 사용되는데요,

한국분석시험연구원에서 시험접수중이니 DPPH assay 시험에 대한 많은 문의 부탁드립니다.