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KATR BLOG 세포의 종류

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● 세포의 종류

세포(cell)는 자라는 위치에 따라
부착성 세포(adherent cell)와 부유성 세포(suspension cell)로 나눌 수 있습니다.

≫ 부착성 세포(adherent cell)

대부분의 cell은 부착성에 속하며 Plate 바닥에 붙어서 자라는 특성을 가집니다.
이 cell을 계대배양(subculture) 할 때에는 cell을 바닥에서 떼어내야 합니다.

A549 – Lung carcinoma cell(폐암세포)

HeLa – Cervix adenocarcinoma cell(자궁경부암세포)

A549와 HeLa cell은 Trypsin과 같은 분해효소를 이용하여
화학적인 방법으로 cell을 바닥표면에서 떼어내는데, 대부분의 cell들이 여기에 속합니다.

①Media를 suction한 후에 PBS로 Washing을 합니다.
② Trypsin 1mL을 넣은 후 CO2 incubator에서 3~5분 incubation합니다.
③ Cell이 떨어진 것을 현미경으로 확인한 후에 media를 첨가하여 원심분리(centrifuging)합니다.
④ 상층액을 모두 suction한 후에 pellet을 풀어준 후 media를 넣어 잘 섞어줍니다.
⑤ cell count 후에 원하는 양의 cell을 새 culture에 넣고 배양합니다.

Raw 264.7 – Mouse macrophase cell(대식세포)

Raw 264.7 cell은 위의 A549와 HeLa와 같은 부착성 세포이지만,
분해효소를 사용하지 않고 scraper를 이용하여 물리적인 방법으로 cell을 바닥에서 떼어냅니다.

① Media를 suction한 후에 새로운 media를 넣어줍니다.
② Scraper를 이용하여 cell을 떼어낸 후 원심분리(centrifuging)합니다.
③ 상층액을 모두 suction한 후에 pellet을 풀어준 후 media를 넣어 잘 섞어줍니다.
④ cell count 후에 원하는 양의 cell을 새 culture에 넣고 배양합니다.
자극을 받은 raw 246.7 cell은 실험에 사용하기 어려우므로
PBS와 Trypsin과 같은 화학적인 방법을 사용할 수 없습니다.
그러므로 Scraper를 사용할 때에는 세포에 최대한 적게 자극을 주어야 합니다.