● 세포 배양 배지(Cell culture media)
안녕하세요 한국분석시험연구원(KATR) 인턴 연구원 정현주입니다.
지난 포스팅에서는 세포에 대해 알아보았는데요,
오늘은 세포가 필요로 하는 성분들을 포함하는 세포 배양 배지에 대해 알아보도록 하겠습니다.
배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하여 필요한 물질을 넣어 혼합한 것을 말합니다.
세균, 진균, 효모 등 다양한 미생물마다 사는 환경이 조금씩 다르기 때문에
배지도 미생물에 따라 차이가 있습니다. 그렇다면 세포에 맞는 배지는 어떠한 것들이 있을까요?
가장 기본적인 구성성분을 포함하고 있는 배지를 기본 배지라 합니다.
기본 배지에는 각종 amino acid, vitamin, 지질, 당질, 핵산염기, 무기염, mineral 등
저분자량의 성분들이 포함됩니다. 기본 배지만으로 증식하는 세포도 있지만, 그 수는 많지 않습니다.
현재는 여러 종류의 세포증식이나 생리기능 발현에 적합한 기본 배지가 개발되어 있고,
일반적으로는 시판되고 있는 액체배지나 분말 배지를 녹여 이용하는 경우가 많습니다.
기본배지는 5~10% 정도의 Fetal bovine serum 등을 첨가해서
배양하는 것에 의해 최적의 세포증식을 얻을 수 있습니다.
여기서 FBS란, 최적의 세포증식이나 생리기능을 발휘하기 위하여 첨가하는 것입니다.
세포배양에서 혈청의 역할은 다음과 같습니다.
*Soybean trypsin inhibition*
혈청 내에는 trypsin을 중화시키는 물질이 포함되어 있습니다.
그래서 혈청을 넣은 배지를 이용하여 배양할 경우에는 trypsin을 중화시키는 과정이 불필요합니다.
그러나 serum-free media나 protein-free media를 이용하여 배양할 때 trypsin을 사용할 경우에는
trypsin inhibitor로 trypsin을 중화시킬 필요가 있습니다. 실험하는 사람에 따라 차이가 있지만,
제가 실험할 때에 DMEM에 넣는 trypsin-EDTA의 농도는 0.25%입니다.
오염되지 않도록 무균 상태 유지에 주의하는 것이 가장 중요합니다.
오염을 방지하기 위해서 항생제를 사용할 수 있지만 세포주에 영향을 줄 수 있으므로 신중히 사용하여야 하며, 사용하기 전 세포 독성을 나타내는 농도를 확인하는 것이 좋습니다.
최근에는 혈청을 사용하는 배양법 대신 무혈청 배지에 의한 세포배양법이 계속해서 개발되고 있습니다.
무혈청 배지에 들어가는 세포성장인자는 세포증식을 촉진하는 인자로써
기본 배지에 포함된 성분 이외에 세포성장인자, 세포접착인자, 호르몬, 결합 단백질, 지질 등이 있습니다.
세포성장인자 등을 첨가한 무혈청 배지는 유리병 등에 보존하면
미량의 단백질성 생리 활성물질이 용기 내벽에 흡착해서 생물활성을 잃어버릴 수 있습니다.
그러므로 유리병보다는 흡착이 어려운 플라스틱 용기 등을 사용하는 것이 바람직합니다.
기본 배지만을 사용하거나 혈청, 세포성장인자 등을 기본배지에 첨가하여
세포에 알맞은 환경을 만들어주면 됩니다.
세포에 알맞은 환경을 잘 모를 때에는 세포주 구매사이트 등을 이용하여 세포의 정보를 확인하시면 됩니다.
실험에 알맞은 배지를 선택하는 데 도움이 되셨나요?
여러분도 세포와 실험 방법에 따라 알맞은
배지를 적용하여 안전하고 좋은 실험하시길 바랍니다
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